STCH减弱Aβ25-35对SH-SY5Y培养细胞神经毒性作用的初步研究

摘要：

目的:研究应激和分子伴侣蛋白(stress and chaperon,STCH)拮抗β淀粉样蛋白(beta-amyloid 25-35,Aβ25-35)在体外对人神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y毒性的机制.方法:用Aβ25-35(20 μmol/L)在不同时间点分别处理SH-SY5Y培养细胞,然后采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白印记(Western Blot)法检测内质网应激相关分子的表达和c-Jun amino-terminal kinase(JNK)的磷酸化,并采用负载钙荧光探针(acetoxymethyl ester of Fura-2,Fura-2AM)钙成像技术检测过表达STCH对100 nmol/L星孢霉素(staurosporin)引起的钙超载的情况.结果:Aβ25-35处理SH-SY5Y细胞后引起STCH mRNA表达上调,在3 h开始升高,12 h达到高峰,然后下降;而葡萄糖调节蛋白94(glucose-regulated protein 94,Grp94)则于处理后6 h表达上调,9 h达到高峰,然后快速下降.Aβ25-35处理SH-SY5Y细胞能够激活JNK通路,致其磷酸化增加,过表达STCH,能够抑制JNK的磷酸化.过表达的STCH能够显著拮抗stauroposrine引起的游离钙增加.结论:STCH可能通过拮抗游离钙增加,抑制JNK通路而发挥保护神经元的作用,这将为我们寻找神经保护的策略提供有益的线索.

关键词：应激和分子伴侣蛋白、β淀粉样蛋白、钙

所属期刊栏目：26

分类号：R3(基础医学)

资助基金：上海市科委自然科学基金07ZR14122

在线出版日期：2011-03-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：643-646