人DAT基因的克隆及其对MN9D细胞多巴胺代谢的影响

摘要：

目的:探讨人多巴胺(DA)转运体(dopamine transporter,DAT)基因过表达对单胺类递质代谢的效应.方法:从人胎脑中提取总RNA,RT-PCR方法扩增DAT cDNA片段,重组于pGEM-T-EASY载体中并进行全序列测定.重组真核表达载体pLNCX2-DAT转染MN9D细胞,Western Blot检测DAT的表达,高压液相(high-performanceliquid chromatography,HPLG)法检测细胞内外DA含量的变化.结果:RT-PCR方法扩增得到1981 bp的cDNA片段,测序结果表明所得到的片段与DAT序列完全一致;Westein Blot证实转染后的MN9D细胞(实验组)内DAT基因表达明显高于对照组(P<0.05);HPLC结果表明实验组中细胞内外的DA含量明显高于对照组(P<0.05).结论:DAT高表达明显促进DA的循环和利用,为帕金森病的基因治疗提供了理论依据.

关键词：帕金森病、多巴胺转运体、基因表达、MN9D细胞

所属期刊栏目：26

分类号：R3(基础医学)

资助基金：北京市优秀人才资助项目2009D0050180000011

在线出版日期：2011-03-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：573-577