骨髓基质细胞体外诱导分化为神经元样细胞的研究

摘要：

本实验观察了骨髓基质细胞(BMSCs)经化学诱导向神经细胞分化的过程,并初步探索其分化机制.首先分离培养扩增纯化SD大鼠BMSCs,应用β-巯基乙醇(BME)对第4代BMSCs进行诱导分化,分化稳定后撤除诱导液继续常规培养2周.结果显示:诱导分化前,细胞呈现梭彤,平行排列生长.诱导分化后,多数BMSCs伸出突起,并发出初级和次级分支,相瓦交织成网状结构,成典型的神经元样细胞形态,分化过程中有部分细胞漂浮死亡.撤除诱导液常规培养2周后,分化的细胞逐渐缓慢恢复剑原来成纤维细胞样长梭状形态.透射电镜观察到分化后细胞具有发育早期神经元的超微结构特点,免疫组织化学方法证实,神经干细胞标志蛋山(Nestin)在诱导分化后即开始表达,1 h达到高峰,此时Nestin阳性细胞率为(29.35±1.45)%,之后随时间逐渐下降,5 h时降至很低;神经元细胞标志蛋白-神经元特异性烯醇化酶(NSE)在诱导分化前不表达,在诱导分化后随时间表达逐渐增强,5 h时阳性细胞率最高为(57.53±2.63)%;撤除诱导液常规培养2周时,Nestin、NSE表达均为阴性.星形胶质细胞标志蛋白-胶质纤维酸性蛋白(Glial fibrillary acidic protein GFAP)测定在不同组、不同时间点均为阴性结果.提示,BMSCs体外经BME化学诱导可向神经元样细胞分化,不能分化为胶质细胞;分化机制可能足先分化为神经干细胞,再转分化为神经元样细胞,这一化学分化过程是迅速、短暂、町逆的.且对细胞有损伤,凶此,化学诱导后的BMSCs不适宜做细胞疗法的种子细胞.

关键词：骨髓基质细胞、神经干细胞、分化

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资助基金：河北省卫生厅指导计划基金08448项目

在线出版日期：2009-12-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：572-576