10.16305/j.1007-1334.2023.2306014
针刺调控脑缺血再灌注损伤大鼠海马区核心基因circHDAC2表达抗神经损伤的研究
目的 探讨针刺对脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠脑保护作用与海马组织差异表达核心基因、转录网中信使RNAs(mRNAs)功能之间的联系,为针刺调控环状RNAs(circRNAs)抗CIRI后神经损伤研究提供参考.方法 将54只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和针刺组,每组18只,后两组采用改良Longa线栓法制备大脑中动脉阻塞再灌注模型,假手术组仅剥离血管,不插线栓.干预期内针刺组捆绑于鼠板并针刺"大椎""水沟""百会"穴,均匀捻转刺激1 min,频率为90次/min,15 min后行针1次,共留针30 min,每12 h干预1次,共7次.假手术组、模型组捆绑于鼠板不针刺.改良加西亚(Garcia)评分法检测大鼠神经功能状况,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法观察脑梗死面积;通过基因芯片技术筛选缺血侧海马组织差异表达基因,整理出模型组/假手术组、针刺组/模型组共同差异表达的环状RNAs(co-DE circRNAs),根据P值、差异倍数(FC)、基因本体(GO)数据库条目富集数量筛选出高表达的核心co-DE circRNAs,分析核心co-DE circRNAs来源基因的GO功能;统计缺血侧海马CA1区尼氏染色阳性细胞数;通过实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)法验证核心co-DE circRNAs表达量,选取表达趋势与芯片结果一致的circRNAs进行竞争性内源RNA(ceRNA)网络预测,对预测网络中的mRNAs进行GO功能富集分析.结果 干预前,与假手术组比较,各造模组改良Garcia 神经功能评分显著降低(P<0.05);干预后,与假手术组比较,模型组脑梗死面积比显著升高,改良 Garcia 神经功能评分和CA1区尼氏染色阳性细胞数显著降低(P<0.05);与模型组比较,针刺组脑梗死面积比显著降低,改良Garcia 神经功能评分和CA1区尼氏染色阳性细胞数显著升高(P<0.05);组内干预前后比较,针刺组改良Garcia 神经功能评分显著升高(P<0.05).芯片结果显示,模型组下调/针刺组上调、模型组上调/针刺组下调的co-DE circRNAs为23个,根据FC>1.25和GO数据库条目富集数量筛选出核心基因为环状RNA组蛋白去乙酰化酶2基因(circHDAC2)、环状RNA神经营养受体酪氨酸激酶2基因(circNTRK2);GO数据库分析显示,二者富集于神经元的产生、神经系统发育、神经元分化等条目.验证其表达量发现,与假手术组比较,模型组大鼠缺血侧海马组织circHDAC2、circNTRK2 表达量均显著下调(P<0.05);与模型组比较,针刺组大鼠缺血侧海马组织circHDAC2、circNTRK2表达量均显著上调(P<0.05).circHDAC2表达趋势与芯片结果一致,由此对circHDAC2 构建相关 ceRNA调控网络,调控网络中mRNAs的GO分析主要富集在神经元的产生、神经元分化的调控、轴突引导、神经系统发育、神经元死亡的调节等条目.结论 针刺可改善CIRI大鼠改良 Garcia神经功能评分与脑梗死面积比,降低缺血侧海马组织的神经元损伤,其作用可能与调控缺血侧海马组织circHDAC2表达以及激发调控网络中mRNA的神经元产生、神经元分化、神经元细胞体功能等有关.
脑卒中、针刺、脑缺血再灌注损伤、大鼠、环状RNA、信使RNA、作用机制、神经损伤
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R285.5;R743;S852.65
国家自然科学基金;湖南省自然科学基金项目;长沙市科技局自然科学基金项目;湖南省研究生科研创新项目
2023-11-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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