黄芪甲苷调控外泌体介导的JMJD3/H3K27me3/OPN通路抗结直肠癌肝转移机制研究

摘要：

目的 研究黄芪甲苷(ASⅣ)抑制结直肠癌肝转移的作用机制,探索ASⅣ对外泌体介导的Jumonji结构域包含蛋白3(JMJD3)/第27位的赖氨酸三甲基化的组蛋白H3(H3K27me3)/骨桥蛋白(OPN)信号通路的影响.方法 取对数生长期的MC38细胞,超速离心法提取MC38细胞外泌体(MC38-EVs)及ASⅣ干预后MC38细胞外泌体(ASⅣ/MC38-EVs),粒径鉴定后用于动物实验.选取C57BL/6J小鼠15只,建立结直肠癌原位肝转移模型后,按照随机数字表法分为模型组、MC38-EVs组、ASⅣ/MC38-EVs组,每组5只.模型组造模前1周尾静脉注射磷酸盐缓冲液(PBS),100 μL/次,隔日1次,连续3周;MC38-EVs组和ASⅣ/MC38-EVs组造模前1周尾静脉分别注射0.1 g/L的MC38-EVs、ASⅣ/MC38-EVs,100 μL/次,隔日1次,连续3周.4周后处死小鼠,观察结直肠癌肝转移情况;苏木精-伊红(HE)染色法观察肝转移灶病理学改变;蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测肝转移灶中JMJD3、H3K27me3、OPN蛋白表达情况;免疫荧光法检测肝转移灶中F4/80+、CD206+巨噬细胞的浸润和JMJD3、H3K27me3、OPN蛋白表达;实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测瘤体中JMJD3、OPN mRNA表达.结果 与模型组比较,MC38-EVs组肝转移灶数目和肝脏质量明显增加(P<0.05);与MC38-EVs组比较,ASⅣ/MC38-EVs组肝转移灶数目和肝脏质量明显减少(P<0.05);免疫荧光结果显示,与模型组比较,MC38-EVs组中肝组织F4/80+、CD206+巨噬细胞浸润程度明显升高(P<0.05);与MC38-EVs组比较,ASⅣ/MC38-EVs组中肝组织巨噬细胞浸润程度明显降低(P<0.05);Western blot、RT-qPCR和免疫荧光结果显示,与模型组比较,MC38-EVs组JMJD3、OPN蛋白和mRNA表达水平明显升高(P<0.05),H3K27me3蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与MC38-EVs组相比,ASⅣ/MC38-EVs组JMJD3、OPN蛋白和mRNA表达水平明显降低(P<0.05),H3K27me3蛋白表达水平明显升高(P<0.05).结论 ASⅣ能够有效抑制结直肠癌肝转移,其机制与调控外泌体介导的JMJD3/H3K27me3/OPN通路激活相关.

关键词：结直肠癌、肿瘤转移、黄芪甲苷、外泌体、肿瘤相关巨噬细胞、中药、药理作用

所属期刊栏目：57

分类号：R735.2;S852.65;R511.7

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;中国博士后基金面上项目;上海市炎癌转化病证生物学前沿研究基地项目

在线出版日期：2023-11-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：42-49