10.16305/j.1007-1334.2019.05.018
益气活血化湿方对被动型Heymann肾炎模型大鼠足细胞裂孔膜蛋白α-actinin-4和CD2AP的调节作用
目的 探讨益气活血化湿方及其拆方对被动型Heymann肾炎(PHN)模型大鼠足细胞裂孔膜蛋白α-actinin-4和CD2AP的调节作用.方法 取雄性Wistar大鼠,制备经典的PHN模型.将造模成功的大鼠随机分为模型组、环孢素组、益气活血化湿方全方组、益气方组、活血方组和化湿方组,另取正常大鼠为对照组.各药物组分别灌胃给予相应药液,对照组和模型组大鼠灌胃给予等量0.9％NaCl溶液,连续6周.分别于第0、2、4、6周对各只大鼠眼眶静脉丛采血,代谢笼收集24 h尿液.全自动生化分析仪检测血清样本白蛋白(Alb)、肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)水平以及尿液样本24 h尿蛋白定量(UPRO).干预结束后,取双侧肾脏.HE染色后光镜下观察肾组织形态学变化,透射电镜下观察肾小球基底膜、足细胞及足突的形态学变化.PCR和Western blot检测肾组织中α-actinin-4和CD2AP的mRNA及蛋白表达水平.结果 ①与对照组相比,模型组大鼠在各时间点UPRO和SCr水平均明显升高(P＜0.05),Alb水平明显下降(P＜0.05).与模型组相比,环孢素组第4、6周UPRO水平明显下降(P＜0.05),第2、4、6周Alb水平明显下降(P＜0.05),但第2、4、6周SCr和BUN水平明显升高(P＜0.05).与模型组相比,全方组仅第6周UPRO水平明显下降(P＜0.05).与环孢素组相比,全方组第2、4、6周SCr和BUN水平明显降低(P＜0.05).②与对照组相比,模型组光镜下观察可见肾小球明显肿大,肾小球基底膜弥漫性增厚,毛细血管襻受压,部分肾小管上皮细胞肿胀;电镜下显示上皮细胞下大量电子致密物沉积,足突广泛融合或消失.与模型组相比,各药物干预组的肾小球病变程度均有减轻.③与对照组相比,模型组α-actinin-4 mRNA和蛋白表达水平显著升高(P＜0.05),CD2AP mRNA和蛋白表达水平显著降低(P＜0.05).与模型组相比,环孢素组α-actinin-4 mRNA和蛋白表达水平显著下调(P＜0.05),CD2APmRNA和蛋白表达水平显著上调(P＜0.05).与模型组相比,全方组α-actinin-4蛋白表达水平显著下调(P＜0.05).④与模型组比较,各拆方组在各时间点的UPRO、Alb、SCr和BUN水平均无明显变化(P＞0.05).病理学观察显示各拆方组肾小球损伤程度较模型组明显减轻.与模型组相比,益气方组α-actinin-4 mRNA和蛋白表达水平显著下调(P＜0.05),活血方组CD2APmRNA和蛋白表达显著升高(P＜0.05).结论 益气活血化湿方可明显降低PHN模型大鼠尿蛋白水平,减轻肾小球损伤,其机制可能与下调裂孔膜蛋白α-actinin-4表达、上调CD2AP表达有关.其拆方益气方具有抑制α-actinin-4表达的作用,活血方具有促进CD2AP表达的作用.
益气活血化湿方、被动型Heymann肾炎、特发性膜性肾病、足细胞裂孔膜蛋白、α-actinin-4、CD2AP
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R285.5;R446.62;R692.31
国家自然科学基金;重点专科建设项目;上海市卫生计生委进一步加快中医药事业发展三年行动计划
2019-06-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
69-75
