10.3969/j.issn.1004-7271.2006.01.003
含绿色荧光蛋白及trp3iar基因的草菇表达载体的构建
分别用限制性内切酶EcoR I和Hind III酶切质粒pBGgHg,将切下的含双孢蘑菇gpd启动子、EGFP基因和35S终止子的碱基序列连接到含Ap抗性的pBSK II上,再将这一段序列切下连接到含kan抗性的pCAMBIA1300载体上,形成中间质粒载体YH2873.用限制性内切酶Hind III分别酶切质粒YH2873和质粒pDB06,将从pDB06切下的trp3iar基因连接到中间质粒载体YH2873上,得到表达载体pSAGF.中间载体pYH2873经限制性内切酶EcoR I和Hind III酶切,电泳后显示1.3 kb的目的片断和9 kb的载体片断,表达载体pSAGF经限制性内切酶Hind III酶切,电泳后显示4 kb的trp3iar基因的目的片断和10 kb的载体片断,进一步测序证明重组质粒连接正确,成功构建了草菇的表达载体pSAGF.
草菇、EGFP基因、trp3iar基因、表达载体
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S188(农业生物学)
上海市科委资助项目003912076
2006-03-23(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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