siRNA 沉默 PCSK6基因对胶原诱导性关节炎的影响

摘要：

目的：探讨 siRNA 沉默 PCSK6基因对胶原诱导性关节炎（CIA）成纤维样滑膜细胞（FLS）生物学行为的影响。方法采用牛Ⅱ型胶原诱导大鼠 CIA 模型，取膝关节滑膜组织原代培养 FLS；采用人工合成的 siRNA oligo-433干扰剂、siRNA oligo-688干扰剂、siRNA oligo-2506干扰剂特异性抑制 PCSK6在 CIA FLS 中的表达，阴性siRNA为阴性对照组，瞬时转染24、36 h 后，采用 RT-qPCR 法检测抑制效率，同时检测 PCSK6基因沉默后各相关基因的表达；采用 MTT、Transwell、细胞划痕、流式细胞术、ELISA 等方法检测干扰 PCSK6表达后对细胞增殖、侵袭、迁移、细胞周期和相关炎性因子分泌的影响。结果转染特异性 siRNA-PCSK6后，各干扰组与阴性对照组相比，siRNA oligo-2506干扰剂转染24 h 时，PCSK6 mRNA 水平抑制效果显著（P ＜0．001），CIA FLS 的增殖受到抑制（P ＜0．001），细胞的侵袭和迁移能力下降（P ＜0．001），肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素-1β（IL-1β）分泌降低（P ＜0．001），G0／G1期的细胞数目增多（P ＜0．05），PCSK6下游基因 CXCL9、MMP2、MMP9、NOSTRIN、HIF-1α、MPZL2、IGF2、PADI4表达均明显下降（P ＜0．05）。结论PCSK6基因沉默对 CIA FLS 的生物学行为具有一定作用，为进一步研究 CIA 发病机制奠定基础。

关键词：PCSK6、siRNA、胶原诱导性关节炎、类风湿关节炎、成纤维样滑膜细胞

分类号：R593.22(全身性疾病)

资助基金：国家自然科学基金;山东省自然科学基金;国家重点基础研究发展计划（973计划）;山东省科技发展计划

在线出版日期：2016-01-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：20-26