小鼠胰岛微血管内皮细胞外泌体的提取和鉴定方法

摘要：

目的：建立小鼠胰岛微血管内皮细胞来源的外泌体的提取和鉴定方法，为糖尿病胰岛微血管内皮受损的发病机制研究及重建胰岛微循环完整性的应用提供必要材料。方法选取小鼠胰岛微血管内皮细胞株（MS-1）细胞作为研究对象，取其培养上清液，经多步离心结合蔗糖／D2O垫超速离心方法获取提取物，然后采用透射电镜和Western blotting 法对提取物进行形态和蛋白成分分析，以确定其是否为外泌体。结果提取物呈形态均一的类圆形囊泡，有完整双层膜包绕，内部含有低电子密度物质。囊泡大小约为40～100 nm，可散在分布，也可聚集成团，提取物均阳性表达CD63、CD9和TSG101分子。结论经过形态和蛋白成分分析证实所提取到的物质正是MS-1细胞来源的外泌体，便于后续临床和基础研究工作的开展。

关键词：小鼠胰岛内皮细胞、外泌体、离心、提取

分类号：R587.1(内分泌腺疾病及代谢病)

资助基金：国家国际科技合作专项基金;济南市科技局科技明星计划

在线出版日期：2015-01-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：6-9