膀胱癌患者血清 microRNA 检测中内参基因的筛选及验证

摘要：

目的：筛选并验证适用于膀胱癌患者血清microRNA（ miRNA）定量检测的内参基因。方法选取100例肌层浸润性膀胱癌患者、105例非肌层浸润性膀胱癌患者及139例健康对照者血清，通过Miseq测序筛选出表达较为稳定的miRNA，采用实时荧光定量PCR （ qRT-PCR）法检测上述筛选出的miRNA及U6表达水平，利用geNorm及NormFinder软件对其稳定性进行分析，并在新的实验组中对软件所推荐内参基因及组合进行验证，选取miR-148b-3p作为靶分子，以进一步分析所选择内参基因的可靠性。结果采用qRT-PCR法对Miseq测序结果进行验证，筛选出hsa-miR-193a-5p、hsa-miR-16-5p、U6、hsa-miR-191-5p和hsa-let-7d-3p作为候选内参基因，经分析和验证后证实，hsa-miR-193a-5p作为内参基因最稳定，hsa-miR-193a-5p和hsa-miR-16-5p的组合为最佳内参组合。同时，miR-148b-3p在膀胱癌患者血清中明显上调并具有一定的诊断价值。结论在对膀胱癌血清miRNA检测时， hsa-miR-193a-5p为最稳定内参基因，hsa-miR-193a-5p和hsa-miR-16-5p为最佳组合，联合应用可使结果更为准确可靠。

关键词：膀胱癌、microRNA、qRT-PCR、内参基因

分类号：R446.11+9;R737.14(诊断学)

资助基金：国家自然科学基金81271916

在线出版日期：2014-06-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：86-91