10.6040/j.issn.1671-7554.2013.08.007
USF2与其截短体真核表达载体的构建及对Smurf1/2转录水平的影响
目的 构建上游刺激因子2(USF2)及其截短体的真核表达载体,鉴定USF2蛋白中抑制泛素连接酶Smurf1/2转录的功能区域.方法 采用PCR技术扩增USF2及其两个截短体USF2(1~ 235aa)、USF2(236 ~346aa)编码基因,分别将其构建在pCMV-Myc重组载体上,转染真核细胞后验证其表达,Western blot及实时定量PCR确定USF2下调Smurf1/2转录水平的区域.结果 成功地将USF2及其两个截短体编码基因构建至pCMV-Myc载体,并验证其在真核细胞中的正确表达,Western Blot和实时定量PCR实验结果显示,USF2 C端236 ~346aa区域对Smuff1/2的转录水平有抑制效应.结论 USF2通过其C端236 ~346aa区域对Smuff1/2的转录产生抑制效应.
上游刺激因子2、Smad泛素调节因子1/2、转录水平、截短体
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R34(人体生物化学、分子生物学)
2016-11-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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