脂多糖所致小鼠睾丸支持细胞GDNF表达减少对精原干细胞的影响

摘要：

目的 探讨脂多糖(LPS)处理后的小鼠睾丸支持细胞(SCs)中胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)表达的变化及该变化对精原干细胞(SSCs)的影响.方法 取5～6周龄昆明小白鼠睾丸组织,分离纯化并培养SCs,将其分为4组:正常对照组(Con组),添加LPS处理1d组(1d组)、2d组(2d组)和3d组(3d组),收集4组培养液作为条件培养液,采用RT-PCR和Western blot检测各组SCs GDNF表达的变化；取5～7d龄昆明小乳鼠睾丸组织,筛选SSCs后分为4组:Con组、Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组,分别用前面的4组培养液培养96 h.通过免疫荧光染色和RT-PCR检测细胞中PLZF、oct4、PCNA和c-kit、sohlh2的表达变化,并通过RT-PCR检测SSCs中Gfrα1、c-ret和Bcl6b、Etv5的表达变化.结果 RT-PCR与Western blot结果显示,SCs GDNF表达按Con、1d、2d、3d组的顺序降低；RT-PCR和免疫荧光染色结果显示,SSCs PLZF、oct4和PCNA的表达按Con、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组顺序降低,而c-kit和sohlh2的表达按Con组、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组顺序升高；SSCs中Gfrα1、c-ret、Bcl6b与Etv5的表达Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组均低于Con组.结论 LPS处理导致小鼠SCs GDNF表达减少,该变化可使SSCs分化加速而其自我更新受到抑制,其机制可能与Bcl6b和Etv5的表达下调有关.

关键词：脂多糖、睾丸支持细胞、胶质细胞源性神经营养因子、精原干细胞、分化、自我更新

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分类号：R321.1(人体形态学)

资助基金：国家自然科学基金30871405,30971653;山东省自然科学基金ZR2009CM018

在线出版日期：2016-11-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：32-41,47