组织块消化法原代培养大鼠输精管平滑肌细胞及鉴定

摘要：

目的 建立一种稳定高效、存活率高的大鼠输精管平滑肌细胞体外分离及培养方法,为相关研究提供理想的细胞模型.方法 采用组织块消化法对大鼠离体输精管平滑肌细胞进行原代培养.采用形态学观察、HE染色、抗α-SMA免疫细胞化学荧光染色对细胞进行鉴定,台盼蓝染色计算细胞存活率及细胞总数,胰酶消化传代并绘制生长曲线.结果 对照实验表明胶原酶Ⅱ消化效果优于胶原酶Ⅰ,最佳消化时间为60 min,同时控制吹打次数、沉淀时间及培养环境,获得了理想的平滑肌细胞总数及存活率.平滑肌细胞呈典型的梭形、长条形,可传代,且出现平滑肌细胞培养典型的“峰-谷”状特征,生长曲线为“S”型.经抗α-SMA免疫荧光鉴定,培养细胞为平滑肌细胞,纯度为(92.6±4.3)％.结论 采用组织块消化法成功建立了大鼠输精管平滑肌细胞的体外分离及培养方法.

关键词：组织块消化法、输精管平滑肌细胞、原代培养、传代培养、大鼠、Wistar

所属期刊栏目：50

分类号：R339.2+1(人体生理学)

资助基金：国家自然科学基金81070503

在线出版日期：2016-11-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：51-56