基质金属蛋白酶对猪脱细胞真皮基质免疫原性的影响
目的 探讨应用基质金属蛋白酶-7(MMP-7)降低“双断层”异种(猪)脱细胞真皮基质(Xeno-ADM)免疫原性的可行性及对真皮支架组织结构的影响.方法 取健康白色家猪边腹部皮肤,机械法制备0.5~0.6 mm厚网状层即“双断层”真皮33块,随机分为正常对照组(A组)、脱细胞处理组(B组)和脱细胞+ MMP-7处理组(C组),每组11块.行HE染色,波形蛋白(Vimentin)、层黏连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原蛋白(ColⅣ)免疫组化染色和扫描电镜检查,观察“双断层”真皮组织的细胞、细胞碎片、毛发残留情况,LN、ColⅣ脱除及半定量情况,和真皮胶原支架组织结构变化.结果 HE染色、Vimentin免疫组化染色和扫描电镜观察显示,B组毛囊内仍残留毛发及含完整细胞的上皮根鞘,原微血管区域可见细胞核、细胞碎片样结构;C组毛囊内未见残留毛发及上皮根鞘,全部视野均未见完整细胞,偶见细胞核、细胞碎片样结构.LN和ColⅣ免疫组化染色观察及半定量分析显示,B组LN和ColⅣ含量明显少于A组(P<0.01)但多于C组(P<0.01),C组LN和ColⅣ基本被完全脱除.扫描电镜及HE染色观察显示,B、C组胶原纤维排列规则近似A组,B组胶原纤维束及胶原纤维之间间隙较A组增大而C组又较B组增大;胶原纤维及胶原原纤维结构完整,未见断裂、融合等破坏性改变.结论 MMP-7处理“双断层”Xeno-ADM,能够有效降低其高免疫原性成分,同时保持真皮胶原支架的正常组织结构并相对扩大其三维网络空间,初步显示良好的研究与应用前景.
组织工程真皮、基质金属蛋白酶-7、猪、细胞外基质、免疫原性
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R622+.1;R318(整形外科学(修复外科学))
济南市留学人员创业计划资助项目20080405
2011-12-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
74-78,99