聚乙烯亚胺介导水通道蛋白5基因表达载体体外转染的研究

摘要：

目的 探讨新型阳离子载体聚乙烯亚胺(PEI)介导水通道蛋白5( AQP5)体外转染人肺腺癌细胞系A549的效果.方法 将含绿色荧光蛋白的真核表达载体pEGFP-N1,以lipofectamine2000为阳性对照,流式细胞仪检测转染效率,根据不同N/P比(5、10、15、20、25)与PEI组成转染复合物转染A549细胞,优化最适N/P比；将AQP5全长cDNA插入pEGFP-N1载体,构建pEGFP-N-AQP5,转染A549细胞,采用PCR与Western blot法检测被转染细胞中AQP5的表达.结果 流式细胞仪检测GFP发光率,N/P比为15时PEI/pEGFP-N1复合物转染效率最高,可达到89.72％,与脂质体91.44％相近；应用PEI与lipofectamine2000将pEGFP-N-AQP5成功转染A549,与空白组比较,AQP5的基因及蛋白表达均增高.结论 新型阳离子载体PEI可成功介导pEGFP-N-AQP5转染A549细胞.

关键词：聚乙烯亚胺、转染、水通道蛋白

所属期刊栏目：49

分类号：R392

资助基金：山东省自然科学基金Y2007C119

在线出版日期：2011-12-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：57-61