荧光定量RT-PCR法检测OATP-B和OATP-D mRNA表达

摘要：

目的 建立荧光定量RT-PCR检测肺癌及正常肺组织中人类有机阴离子转运多肽(organic anion transporting polypeptide,OATP)OATP-B、OATP-D mRNA表达的方法,了解肺癌和正常肺组织中OATP-B、OATP-D mRNA的表达水平.方法 利用RT-PCR方法从肺癌及正常肺组织中扩增出目的 基因片段,用TA克隆的方法将基因片段插入到PGEM-T质粒载体中,在Line-Gene荧光定量检测系统上建立检测OATP-B、OATP-D mRNA表达的标准曲线,并通过40例肺癌及正常肺组织标本进行验证.结果 成功构建了OATP基因的质粒重组子,建立了在mRNA水平定量检测OATP-B、OATP-D基因的标准曲线,相关系数为0.998.以荧光定量RT-PCR法检测,OATP-B、OATP-D的mRNA在肺癌及正常肺组织中均有表达,且肺癌中OATP-B、OATP-D mRNA的表达水平高于正常肺组织(P＜0.05).结论 成功建立了荧光定量RT-PCR检测OATP-B、OATP-D mRNA表达的方法,检测结果用绝对拷贝数表示,定量准确可靠,敏感性高.

关键词：逆转录聚合酶链反应、荧光定量、OATP基因、TA克隆

所属期刊栏目：47

分类号：R361.3(病理学)

在线出版日期：2010-03-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：70-73,77