RNA干扰沉默人血管平滑肌细胞胱抑素C基因表达及对组织蛋白酶S表达的影响
目的 研究小干扰RNA(siRNA)对胱抑素C(CysC)基因表达的抑制作用及对组织蛋白酶S(CatS)表达的影响.方法 利用Ambion公司设计合成的以CysC为靶标的siRNA,通过脂质体转染人血管平滑肌细胞(VSMC),以未转染siRNA细胞和转染无关siRNA细胞为对照,采用RT-PCR和Western blot分别检测CysC在mRNA水平和蛋白水平的改变.选取抑制效率最高siRNA转染VSMC,以空白对照组、无关干扰组和CysC高表达组为对照,采用RT-PCR法和Western blot分别检测CatS在mRNA水平和蛋白水平的改变.结果 转染24h后,siRNA组CysC mRNA和蛋白表达均被有效抑制,与空白对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01),其中,siRNA2的抑制效率最高.CatS的mRNA及蛋白表达水平在siRNA组均有明显升高,与其他三组比较,差异有统计学意义(P<0.01).结论 体外转录合成的siRNA可有效抑制人VSMC中CysC的表达,并对CatS基因表达有一定影响.
基因表达、胱抑素C、组织蛋白酶S、血管平滑肌细胞
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R541.4(心脏、血管(循环系)疾病)
山东省中医药管理局科学技术研究专项课题基金2005-043;山东省自然科学基金Y2005C12
2010-03-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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