利用RNAi技术抑制Bcl-2基因表达增强肺腺癌A549细胞放射敏感性

摘要：

目的 利用RNAi技术抑制Bcl-2基因的表达,观察其对肺腺癌A549细胞凋亡和放射敏感性变化的影响.方法 构建Bcl-2基因的干扰质粒pBcl-2-siRNA,稳定转染人肺腺癌A549细胞,同时设立转染无意义链组、空载体组和未转染组.采用Real time RT-PCR和Western blot方法, 观察Bcl-2基因在mRNA和蛋白水平表达的变化.采用流式细胞术和克隆形成方法,检测RNA干扰对A549细胞放射敏感性的影响.结果 成功构建bcl-2 siRNA质粒,转染A549细胞,获得稳定转染细胞株A549/Bcl2-Ins;Bcl-2mRNA、 Bcl-2蛋白表达明显降低;A549/Bcl2-Ins凋亡率[(10.11±0.92)%]明显高于对照组,6Gy X线照射后凋亡率[(28.81±1.10)%]明显高于对照组及未照射组;A549/Bcl2-Ins的D0和Dq值分别为1.399和1.298,明显低于转染无意义序列细胞株A549/Bcl2-Neg(1.695和2.480)、转染空载体细胞株A549/SD (1.706和2.227)和空白对照细胞A549(1.816和2.777).结论 RNAi技术可以有效抑制肺腺癌A549细胞Bcl-2基因的表达,增强A549细胞对X线的放射敏感性.

关键词：肺肿瘤、基因、细胞凋亡、辐射耐受性、RNA干扰

所属期刊栏目：47

分类号：R734.2(肿瘤学)

资助基金：山东省科技发展计划项目2006GG3202008

在线出版日期：2009-07-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：35-38,42