hTRX-PR39融合基因cDNA克隆的构建及鉴定

摘要：

目的 研究人硫氧还蛋白(hTRX)和抗菌肽PR39基因在脑缺血疾病治疗中的作用,构建hTRX-PR39cDNA融合基因.方法 设计合成PR39、hTRX正向和反向引物,采用PCR方法,扩增获得两端具有BamHI和Ecor721、Eco721和EcoI酶切位点的PR39 cDNA和hTRX cDNA片段,并分别克隆到pGEM-T easy中,转化细菌,筛选阳性克隆,酶切鉴定并测序.BamH I和EcoR721双酶切pGEM-T-hTRX和pGEM-T-PR39,将获取的PR39/BamHI,EcoR721片段克隆到pGEM-T-hTRX/BamHI,EcoR721载体中,构建pGEM-T-hTRX-PR39载体.结果 经DNA测序证实,修饰过的hTRX cDNA、PR39 cDNA片段的核酸序列和推导的氨基酸同数据库资料一致.重组质粒pGEM-T-hTRX-PR39酶切图谱证实hTRX-PR39融合肽cDNA已克隆到pGEM-T表达载体中.结论 成功克隆出具有EcoR721和EcoRI、BamH I和EcoR721酶切位点的hTRX cDNA和PR39 cDNA片段,并构建pGEM-T-hTRX-PR39载体.

关键词：脑缺血、硫氧还蛋白、基因融合、抗菌肽PR39

所属期刊栏目：47

分类号：R743(神经病学与精神病学)

在线出版日期：2016-11-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：30-34,42