荧光巨细胞病毒的构建及活性检测
目的 构建表达绿色荧光蛋白的巨细胞病毒Towne株,检测其活性,研究其在抗巨细胞病毒药物筛选中的应用价值.方法 将PHM673质粒扩增纯化,采用脂质体转染法转入原代培养的人胚肺成纤维细胞,感染人巨细胞病毒,获得重组病毒GFP-HCMV,采用空斑法纯化重组病毒,采用PCR法鉴定,获得携带绿色荧光蛋白的重组巨细胞病毒.用抗病毒药物更昔洛韦进行干预,检测重组病毒荧光表达强度与药物浓度的关系.结果 成功构建携带绿色荧光蛋白的重组巨细胞病毒,荧光病毒的活性与原始病毒的活性差异无统计学意义(P>0.05),生长繁殖并没有受到影响.重组病毒的荧光表达强度与抗巨细胞病毒药物更昔洛韦抑制病毒的效价有关.结论 该荧光病毒可以作为研究病毒致病机制和抗病毒药物筛选的新型工具.
巨细胞病毒、转染、绿色荧光蛋白
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R373(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
2016-11-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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