10.3969/j.issn.1671-7554.2007.07.010
人肾小球系膜细胞原代培养及鉴定方法的研究
目的:建立一种重复性好、传代次数多的人肾小球系膜细胞培养方法.方法:取肾脏肿瘤手术切除后远离患病部位的正常肾脏组织、水囊引产的胎儿肾,三层筛网滤过分离,取最下层筛网上组织,用胶原酶消化,培养正常人肾小球系膜细胞.同时采用形态学观察和免疫荧光技术,对鼠抗人结蛋白,鼠抗人角蛋白进行鉴定,采用MTT、流式细胞仪技术对不同来源肾脏的系膜细胞生长状况进行比较.结果:形态学、免疫荧光法鉴定表明培养细胞为肾小球系膜细胞,胎肾原代培养后8~10 d即可传代,而成年肾脏原代培养后需15~16 d方可传代.成年肾脏培养细胞至第4代细胞生长缓慢,贴壁能力减弱,出现死亡.而胎肾培养细胞则可继续培养至第7~10 代.结论:三层滤网法分离人肾小球系膜细胞,方法简单、高效,培养的原代肾小球系膜细胞符合肾小球系膜细胞的生物学特性,且进一步证明胚胎组织比成年个体肾脏原代细胞培养容易成功.
肾小球系膜细胞、细胞原代培养、成人肾脏、胎肾
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R692(泌尿科学(泌尿生殖系疾病))
山东省自然科学基金Y2001C28
2007-09-03(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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