CTGF shRNA对肝星状细胞细胞因子及细胞外基质表达的影响

摘要：

目的:研究结缔组织生长因子(CTGF)短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)对肝星状细胞(HSC-T6)中TGF-β1、CTGF、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原基因表达及细胞外基质分泌的影响 .方法:将已构建并筛选有效含绿色荧光蛋白(EGFP)的CTGFshRNA质粒以转染试剂Metafec tene转染HSC-T6,另设空质粒组、只加Metafectene组及空白对照组,24 h及48 h后,用 RT- PCR法检测各组细胞中TGF-β1、CTGF、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原mRNA的表达;放免法分析细胞上清液中Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、透明质酸和层粘连蛋白的含量;流式细胞仪分析转染效率.结果:CTGFshRNA质粒在肝星状细胞的转染效率24 h、48 h分别为(60±5)% 、(42±3)%;与空白对照组相比,空质粒组、脂质体组对基因表达及细胞外基质的分泌均无影响,而CTGFshRNA 能明显抑制CTGF、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原mRNA的表达,降低上清液中Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、透明质酸和层粘连蛋白的含量(P＜0.01或P＜0.05),而对TGF-β1的基因表达则无影响 .结论: CTGFshRNA可明显抑制肝星状细胞CTGF、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原基因表达及细胞外基质的分泌.

关键词：RNA干扰、短发夹RNA、转化生长因子β、结缔组织生长因子、肝纤维化

所属期刊栏目：45

分类号：R503;R575.2

资助基金：山东省卫生厅青年项目2005年第25号

在线出版日期：2007-07-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：577-581,594