人外周血内皮前体细胞的分离、培养及流式细胞仪动态检测

摘要：

目的:建立人外周血内皮前体细胞(EPCs)分离、诱导的方法,并利用流式细胞仪鉴定人内皮前体细胞的培养效果,为血管生成的细胞治疗研究奠定基础.方法:Ficoll密度梯度离心提取单个核细胞(MNCs),接种在人纤连蛋白包被的培养板上,培养于EGM-2MV中,4 d后,粘附细胞用Dil-AC-LDL和FITC-UEA-1染色,采用荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜观察.第4天到第7天,应用流式细胞仪动态检测粘附细胞表面标志CD34、CD31、KDR.结果:MNCs培养4 d后,荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜下可观察到Dil-AC-LDL和FITC-UEA-1双阳性的粘附细胞,流式细胞仪检测结果显示,CD34、CD31、KDR阳性细胞表达率分别为(2.50±1.47)%、(5.72±1.66)%、(36.24±3.24)%.第5、6和7天,CD34和CD31阳性细胞阳性率分别为(8.45±3.97)%、(22.52±3.86)%,(14.13±2.79)%、(42.76±3.67)%,(21.14±2.91)%、(54.67±3.44)%.结论:外周血中确实存在EPCs,并且在体外能被诱导分化为成熟的内皮细胞.

关键词：内皮前体细胞、细胞培养、表面标志

所属期刊栏目：44

分类号：Q254;R543(细胞生理学)

资助基金：山东省自然科学基金Z2003C01

在线出版日期：2007-03-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1197-1201