MDR1启动子调控的双自杀基因真核表达载体的构建及其在K562/A02细胞中的表达

摘要：

目的:构建多药耐药基因(MDR1)启动子调控的CD-TK双自杀基因真核表达载体用于耐药白血病的靶向性基因治疗.方法:采用PCR方法从K562/A02细胞基因组DNA中扩增MDR1启动子,将其连接到双自杀基因CD-TK的上游,构建pcDNA3-MDR1-Promoter-CD-TK真核表达载体,用脂质体介导法将构建好的载体转染入K562、K562/A02细胞,PCR鉴定CD、TK基因的整合,RT-PCR鉴定CD、TK基因的表达.结果:PCR克隆出MDR1启动子经DNA测序证实序列正确,通过连接成功构建含正确目的基因的表达载体pcDNA3-MDR1-Promoter-CD-TK.转染入细胞后PCR结果显示,CD、TK基因均整合入K562、K562/A02细胞中,RT-PCR结果显示,K562/A02/CD-TK细胞CD、TK基因有特异性条带表达,而K562/CD-TK细胞无特异性条带.结论:MDR1启动子调控的CD-TK双自杀基因真核表达载体的成功构建及其在K562/A02细胞中的特异性表达为耐药白血病的靶向性基因治疗提供了实验基础.

关键词：基因、MDR、启动子、自杀基因、质粒

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分类号：R733.7;Q786(肿瘤学)

资助基金：中国科学院资助项目30471941;山东省科技发展基金031050104;山东省科技发展基金2002BB1CJA3

在线出版日期：2006-05-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：336-340