HPV16L1E7的基因克隆及其在大肠杆菌中的表达

摘要：

目的:研究人乳头瘤病毒(HPV)的主要衣壳蛋白L1和主要的转化蛋白E7的融合基因在原核细胞中的表达,为研制HPV16L1E7疫苗和诊断试剂盒提供依据.方法:采用聚合酶链反应(PCR)以重组质粒pUC19L1E7为模板扩增HPV16L1E7基因片段,克隆至载体pMD18-T中,并用限制性内切酶将HPV16L1E7基因切下,克隆至原核表达质粒pQE30中,经IPTG诱导表达,再使用SDS-PAGE和蛋白印迹检测其抗原性和表达水平.结果:HPV16L1E7融合蛋白能被抗HPV16L1抗体识别,分子量为66KD,经IPTG诱导4 h后,表达的HPV16L1E7融合蛋白占菌体总蛋白量的25%以上.结论:成功构建的表达载体pOE30-L1E7可在原核表达细胞中高效表达,且表达出的HPV16L1E7融合蛋白具有反应活性,可与HPV16抗体发生反应.

关键词：乳头状瘤病毒、人、克隆、分子、大肠杆菌、基因表达

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分类号：R737.9;Q785;Q786(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金39870739;山东省卫生厅资助项目;山东大学校科研和教改项目

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：112-115