含变形链球菌PAcA基因的真核表达质粒pcDNA3.1-PAcA的构建与鉴定

摘要：

目的:构建含有免疫刺激序列、可防止变形链球菌在牙面粘附的DNA疫苗.方法:利用PCR技术由质粒pPAcA-CTA2B扩增编码PAcA的DNA片段;通过T-A克隆技术将目的DNA片段克隆于载体pMD18-T,鉴定插入方向后,将目的DNA从载体上释放,再克隆于含有CpG免疫刺激序列的真核表达载体pcDNA3.1,构建出用作防龋疫苗的真核表达质粒pcDNA3.1-PAcA.结果:通过对重组质粒pcDNA3.1-PAcA进行酶切图谱和DNA序列测定分析,证明真核表达重组质粒pcDNA3.1-PAcA构建成功、阅读框架正确.结论:利用T-A克隆等技术可成功将编码PAcA的DNA片段克隆到含有免疫刺激序列CpG的真核表达载体pcDNA3.1,构建出真核表达重组质粒pcDNA3.1-PAcA.

关键词：龋齿、疫苗构建、CpG基元、T-A克隆

所属期刊栏目：40

分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金30171010;山东医科大学校科研和教改项目413026

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：289-291