拟南芥酪氨酸蛋白磷酸酶PTP135基因克隆及功能分析

摘要：

拟南芥PTP135T-DNA插入突变体ptp135具有与phyB突变体相似的特征,萌发时下胚轴伸长、子叶张开角度小、展开慢,后期表现为开花早、叶色浅、叶柄长、叶面积增大.采用PCR法从拟南芥叶片中克隆PTP135启动子基因,PTP135启动子连接到载体pCAMBIA1391,构建植物双元表达载体pCAMBIA1391-135p,构建的载体经过鉴定后,运用农杆菌介导的沾花法将PTP135启动子转化野生型拟南芥,用潮霉素筛选转化阳性株,对阳性株进行GUS组织化学染色,结果表明PTP135基因定位在维管束、柱头和花丝.采用PCR方法从拟南芥叶片中克隆PTP135基因,连接到载体pEZS-NL,构建瞬时表达载体pEZS-NL-135e,采用基因枪法转化洋葱表皮,结果表明PTP135编码的蛋白定位在细胞核和细胞膜.拟南芥野生型、ptp135和phyB,待即开花时取样,做光周期特异性基因CO、FT的RT-PCR表达分析,结果表明CO和FT基因在ptp135突变体中表达时间延长,表达量增加,证明PTP135可以在转录水平上调控CO和FT,PTP135参与植物开花调控途径,作用位点在CO上游.

关键词：拟南芥、酪氨酸蛋白磷酸酶、基因克隆

所属期刊栏目：53

分类号：Q943.2(植物学)

资助基金：广东省教育科学规划课题2021GXJK144

在线出版日期：2023-03-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：803-810