10.16252/j.cnki.issn1004-0501-2021.06.001
1,25(OH)2D3对miR-130b转染的高糖条件下HMC细胞TGF-β1/Smad3及Col-Ⅳ表达的影响
目的 观察高糖环境下1,25(OH)2D3对miR-130b转染肾小球系膜细胞TGF-β1/Smad3、Col-Ⅳ表达水平的变化,探索1,25(OH)2D3是否可通过miR-130b改善糖尿病肾病肾脏纤维化的过程.方法 HMC细胞传代培养,miR-130b mimics 及 miR-130b inhibitor 经 LipofectamineTM 2000转染肾小球系膜细胞,依据分组加入 1,25(OH)2D3 1.0×10-8 mol/L,37℃、5%CO2饱和湿度条件下继续培养48 h,共分为6组:①空白对照组;②细胞+无水乙醇组(A组);③细胞+miR-130b mimics+无水乙醇组(B 组);④细胞+miR-130b mimics+1,25(OH)2D3组(C 组);⑤细胞+miR-130b in-hibitor+无水乙醇组(D组);⑥细胞+miR-130b inhibitor+1,25(OH)2D3组(E组).以实时荧光定量PCR检测细胞miR-130b 及 TGF-β1、Smad3、Col-ⅣmRNA 的表达水平,以 Western blot 方法检测细胞 TGF-β1、Smad3、Col-Ⅳ 蛋白的表达水平.采用多组间比较的单因素方差分析及组内两两比较采用LSD、Dunnett's T3法比较各组数据.结果 空白对照组与A组细胞miR-130b、TGF-β1、Smad3、Col-Ⅳ表达水平,差异无统计学意义(P>0.05),与A组相比,B组miR-130b、TGF-β1、Smad3、Col-Ⅳ 表达水平明显升高(P<0.05),D 组 miR-130b、TGF-β1、Smad3、Col-Ⅳ 表达水平明显降低(P<0.05).经1,25(OH)2D3治疗发现,与B组相比,C组miR-130b、TGF-β1、Smad3、Col-Ⅳ表达水平明显降低(P<0.05),与D组相比,E组miR-130b、TGF-β1、Smad3、Col-Ⅳ表达水平明显降低(P<0.05).结论 1,25(OH)2D3可降低miR-130b转染肾小球系膜细胞miR-130b及纤维化相关因子TGF-β1、Smad3、Col-Ⅳ的表达水平,1,25(OH)2D3可能通过miR-130b改善糖尿病肾病肾脏纤维化的过程.
1、25(OH)2D3、HMC 细胞、高糖、miR-130b 转染、TGF-β1/Smad3、Col-Ⅳ
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R587.2(内分泌腺疾病及代谢病)
新疆维吾尔自治区自然科学基金2020D01C192
2021-08-04(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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