10.3969/j.issn.1004-0501.2010.08.001
杀伤细胞受体KIR3DS1胞外区的表达及纯化
目的 表达并纯化杀伤细胞受体KIR3DS1胞外区.方法 采用定向克隆的方法将KIR3DS1胞外区基因连接到pET28a-DsbA载体上,成功构建pET28a-DsbA/KIR3DS1重组质粒.将重组质粒导入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导DsbA-KIR3DS1融合蛋白表达,溶解于8M尿素中的包涵体经Ni-NTA琼脂糖亲和层析纯化,成功进行复性,再经Su-perdex75凝胶层析柱进一步纯化,SDS-PAGE和WesterD blot鉴定目的蛋白的表达及纯化.结果 表达产物呈部分可溶性表达,包涵体纯化后证实获得纯度>95%的DsbA-KIR3DS1融合蛋白.结论 KIR3DS1胞外区的成功表达及纯化,为进一步研究KIR3DS1与相应配体之间相互作用奠定了基础.
杀伤细胞、受体、原核表达、蛋白纯化
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R392.11
中国博士后科学基金资助项目20060390422
2010-11-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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