普鲁兰酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达

摘要：

以普鲁兰酶生产真菌 YBJ10-2基因组 DNA 为模板,PCR 扩增出普鲁兰酶的结构基因,将此基因插入载体pPIC9K,构成重组质粒 pPIC9K-Pullulanase,转化毕赤酵母 SMD1168,并通过 G418平板培养基筛选高拷贝转化子,普鲁兰酶表达并分泌到胞外.该酶的表达受甲醇的严格调控和诱导,摇瓶培养中,当甲醇达到最佳诱导浓度3%,酶的最高表达量可达225U/mL.该酶能够长时间保持稳定,并具有较高的酶活力.重组毕赤酵母遗传稳定性良好.

关键词：普鲁兰酶、克隆表达、毕赤酵母 SMD1168、pPIC9K

分类号：TQ925(其他化学工业)

在线出版日期：2013-01-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：24-27