10.3969/j.issn.1674-506X.2011.06.014
Thermotoga neapolitana α-葡萄糖苷酶基因克隆及表达
本文拟克隆新阿波罗栖热袍菌(Thermotoga neapolitana DSM 4359)的一种α-葡萄糖苷酶基因(TNAG),其GenBank注册号为1c127401.首先以T.neapolitana DSM 4359基因组DNA为模板,通过PCR扩增目的基因并完成T克隆,在NCBI数据库中比对结果表明:目的基因与Thermotoqa sp.RQ2等氨基酸序列相似度高于99%.再将目的基因连接至表达载体pET-32a(+),并导入大肠杆菌Rosetta中用IPTG诱导表达.SDS-PAGE显示表达蛋白的大小约为72KDa.热纯化后酶液测活反应的最适温度为80℃,最适pH在5.0左右.
新阿波罗栖热袍菌、α-葡萄糖苷酶、克隆、表达
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Q556(酶)
吉林省科技厅自然科学基金20090553
2012-03-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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