10.16036/j.issn.1000-2650.202304382
嗜水气单胞菌感染大口黑鲈肠炎模型的建立及评价
[目的]采用嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)感染建立稳定大口黑鲈(Micropterus salmoides)的细菌性肠炎模型,并确定导致肠炎发生的细菌浓度和作用时间.[方法]150尾健康的大口黑鲈随机分为5组:对照组和4个试验组(感染浓度分别为1×108、1×107、1×106和1×105 CFU/mL),通过腹腔注射方式进行人工感染.通过临床症状、剖检病变及评分、组织学变化及评分、肠道组织超微结构变化和炎症因子基因表达量评价各试验组造模效果.[结果]攻毒后试验组表现出游动慢,摄食下降的现象,且在攻毒第2和第3天时,1×108 CFU/mL攻毒组有死亡现象.剖检后可见肛门红肿、外突,腹鳍和腹部皮肤出血等症状,肠道充血、出血,部分可见肠液潴留等.各组大体病理得分与细菌的感染浓度呈正相关,与感染时间呈负相关.组织学观察可见肠道固有层充血、水肿、增厚,并伴有炎性细胞浸润,黏膜上皮损伤脱落、细胞变性、坏死、增生,杯状细胞数目明显增加;组织病理得分随细菌浓度升高而升高,随感染时间呈现先上升后下降的趋势,在感染第5天得分最高.肠道组织超微结构变化显示,攻毒组肠道微绒毛损伤脱落,形态紊乱,上皮细胞排列紊乱,线粒体水肿,出现空泡,部分细胞胞浆中细胞器溶解甚至消失,杯状细胞数目增多.各试验组炎症因子表达量的变化与细菌浓度有关,IL-15、IL-8、TNF-α和IL-1β的表达量随细菌浓度的升高而升高,且随时间呈现先上升后下降的趋势.IL-10、IL-11和TGF-β2的表达量与感染浓度呈负相关,其中IL-10和IL-11的基因表达量变化显著低于对照组,TGF-β2的基因表达量变化不显著.[结论]1×107 CFU/mL攻毒组在整个试验过程中未出现死亡,病理学观察显示肠道有较明显的病理损伤.因此,为构建接近临床条件的细菌性肠炎模型,选择攻毒剂量为200 μL 1×107CFU/mL的菌液作为肠道病理损伤模型的感染浓度.
大口黑鲈、细菌性肠炎、模型、嗜水气单胞菌
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S943(水产保护学)
成都市科技局项目2022YF0501021SN
2024-09-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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