麻疯树脱氢抗坏血酸还原酶基因克隆及重组蛋白纯化

摘要：

利用RACE技术克隆出麻疯树脱氢抗坏血酸基因JcDHAR,构建原核表达载体pET-28a-JcDHAR,并对重组菌表达的条件进行了优化,进而进行Ni亲和层析纯化蛋白.结果表明:表达产物与预期大小相符,His-JcDHAR蛋白质的分子质量为30 kD;在37℃的条件下0.1mM的IPTG诱导表达5h时,获得了可溶性重组蛋白,通过体外酶学反应鉴定,纯化样品具有酶学活性,表明JcDHAR原核表达成功.

关键词：脱氢抗坏血酸还原酶、原核表达、蛋白纯化、麻疯树

所属期刊栏目：51

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金31071448

在线出版日期：2014-11-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1085-1091