强化融合蛋白lhFⅦ-LDM对人肺腺癌细胞A549体内致瘤性的抑制

摘要：

以人凝血因子Ⅶ(FⅦ) cDNA和编码力达霉素(LDM)辅基蛋白LDP的质粒(pET-VH-LDP)为模板,通过PCR及搭桥PCR构建原核表达人凝血因子Ⅶ轻链(the light chain of FⅦ,lhFⅦ)和LDP融合蛋白lhFⅦ-LDP的重组质粒pET19b-lhFⅦ-LDP.重组质粒转化感受态表达菌株E.coli Rosetta-gami B(DE3) pLysS,诱导表达后亲和纯化,并以Westernblot鉴定得到的融合蛋白lhFⅦ-LDP.将lhFⅦ-LDP与LDM的烯二炔发色团(AE)进行分子组装制备强化融合蛋白药物lhFⅦLDM.用免疫共沉淀(co immunoprecipitation,co IP)检测lhFⅦ-LDP与人肺腺癌细胞A549组织因子(TF)的结合特异性,并通过裸鼠移植瘤实验研究lhFⅦ-LDM对A549细胞体内致瘤性的影响.结果显示,lhFⅦ-LDP能够与TF特异性结合,并且,强化融合蛋白lhFⅦ-LDM能够显著抑制A549细胞的体内致瘤性.

关键词：凝血因子Ⅶ轻链(lhFⅦ)、LDM、组织因子(TF)、A549细胞、体内致瘤性

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分类号：Q25(细胞生理学)

资助基金：重大新药创制科技重大专项2009ZX09103-698;国家自然科学基金31000579;四川省科技创新研究团队专项计划2011JTD0026

在线出版日期：2014-11-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1029-1034