piggyBac共转染系统的构建以及转座活性的验证

摘要：

piggyBac(PB)转座子的末端反向重复序列(ITR)和转座酶编码序列(PBase)分别克隆于质粒PB1156、atub-pBac-K10.ITR与包含红色荧光蛋白表达序列(RFP)的质粒pmCherry-N1重组构成供体质粒(Donor)； PBase与真核表达载体pEFrF-PGK重组构成辅助质粒(Helper).使用由供体质粒与辅助质粒组成的PB二元共转染系统转染HEK293细胞,结果表明该二元共转染系统具有较好的转座活性,并且在分子水平验证了转座的发生以及使用反向PCR(IPCR)定位了其中一个转座插入位点在HEK293基因组DNA上的位置.

关键词：转座子、piggyBac(PB)、共转染、IPCR

所属期刊栏目：48

分类号：Q789(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金重大研究计划90919005;教育部博士点基金20090181120076

在线出版日期：2012-01-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：943-948