结核分枝杆菌热休克蛋白HtpG基因的原核表达与鉴定

摘要：

目的 克隆并表达结核分枝杆菌HtpG分子,并鉴定其免疫反应性.方法 采用聚合酶链式反应扩增结核分枝杆菌H37Ra HtpG基因,并克隆至pET22b质粒,测序筛选到重组成功的质粒.重组质粒pET22b-HtpG转化大肠埃希菌BL21(DE3),表达的HtpG重组蛋白通过镍柱纯化.Western blot鉴定表达蛋白,并使用HtpG重组蛋白经ELISA法检测肺结核患者血清特异性抗体水平.结果 成功构建了pET22b-HtpG重组质粒;在大肠埃希菌中表达出分子质量约73kDa的重组蛋白.Westem blot鉴定该重组蛋白具有良好免疫反应性,ELISA法检测肺结核患者血清中存在特异性抗HtpG抗体.结论 在大肠埃希菌内成功表达HtpG重组蛋白,为将该蛋白用于结核免疫诊断试剂的研制奠定了基础.

关键词：结核分枝杆菌、热休克蛋白、HtpG、表达、纯化

所属期刊栏目：17

分类号：R392.11

资助基金：安徽省省级大学生创新训练项目201710367065

在线出版日期：2020-06-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：206-209,232