粉尘螨主要变应原基因Der f2和Der f3基因改组的优化

摘要：

目的：优化粉尘螨变应原Der f2和Der f3基因改组条件，以期获得粉尘螨变应原融合突变基因。方法 RT- PCR方法扩增粉尘螨变应原Der f2和Der f3基因，用DnaseⅠ分别酶解Der f2和Der f3基因10、15、20、25、30min；酶解相同时间的Der f2和Der f3基因两两混合，采用DNA shuffling技术对粉尘螨变应原Der f2和Der f3基因进行重组，电泳检测重组子。结果以Der f1 F和Der f1 R、Der f2 F和Der f2 R为引物分别在酶切10min、15min、20min、25min均可扩增出清晰条带；以Der f2 F和Der f3 R为引物在酶切10min、15min和30min的模板中亦出现PCR片段。结论通过多种条件的组合，可获得多个粉尘螨变应原Der f2和Der f3基因间的融合基因，为大规模制备高效，低价的哮喘疫苗奠定基础。

关键词：DNA改组、Der f2、Der f3、融合基因、优化

分类号：R4 ;R38

资助基金：国家自然科学基金资助项目81270091;安徽省自然科学基金资助项目070413088

在线出版日期：2014-05-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：3-6