10.16073/j.cnki.cjcpt.2023.07.04
SEMA5A对肝细胞癌增殖及凋亡的影响及可能机制
目的 探讨信号素5A(SEMA5A)对人肝细胞癌(HCC)增殖及凋亡的影响并初步探讨可能的发生机制.方法 应用定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)方法检测2021-01-01-06-30南通大学附属医院30例新鲜HCC组织及配对癌旁肝组织和2020-06-01-2021-12-31收集30例正常肝组织中SEMA5A mRNA的表达;应用蛋白质印迹法检测人HCC细胞株HepG2、Huh7、SK-HEP1、Hep3B及正常肝细胞株LO2中SEMA5A蛋白的表达;转染SEMA5A siR-NA沉默HCC细胞株中SEMA5A的表达,qRT-PCR检测沉默效率;四甲基偶氮唑(MTT)比色实验及克隆形成实验检测细胞增殖;碘化丙啶染色流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹检测沉默后SEMA5A、Cleaved caspase-3及Cleaved caspase-9的蛋白表达.结果 新鲜HCC组织中SEMA5A mRNA的表达(0.77±0.26)低于配对的癌旁肝组织(1.46±0.38)及正常肝组织(1.56±0.36),差异有统计学意义,t值分别为8.030和9.574,均P<0.001.SEMA5A mRNA表达既可以区分HCC及癌旁肝组织,灵敏度和特异度分别为83.33％和93.33％;也可以区分HCC及正常肝组织,灵敏度和特异度分别为96.67％和86.67％.LO2、HepG2、Huh7、SK-HEP1和Hep3B细胞株中的SEMA5A的蛋白相对表达量分别为1.02±0.12、0.72±0.06、0.73±0.05、0.37±0.09及0.23±0.05,与LO2细胞株相比,4株HCC细胞株中SE-MA5A的蛋白表达水平下降,差异有统计学意义,F=50.230,P<0.001.沉默SEMA5A的HepG2(F处理组=366.400,P<0.001;F时间点=508.100,P<0.001;F处理组×时间点=2.009,P=0.186)及Huh7(F处理组=60.110,P=0.001;F时间点=699.600,P<0.001;F处理组×时间点=9.417,P=0.004)细胞增殖活力高于对照组,差异有统计学意义.与对照组比较,沉默SEMA5A后,HepG2〔(46.33±3.51)％〕及Huh7〔(43.67±4.04)％〕细胞的克隆形成率更高,差异有统计学意义,F值分别为28.840和10.640,P值分别为0.008和0.011;沉默SEMA5A后HepG2及Huh7细胞的凋亡率分别为(1.34±0.19)％及(2.45±0.23)％,低于对照组,差异有统计学意义,F值分别为195.500和300.900,均P<0.001.沉默SE-MA5A后,HepG2细胞内SEMA5A、Cleaved caspase-3及Cleaved caspase-9的蛋白相对表达水平为0.34±0.04、0.19±0.01及0.33±0.04,低于对照组,差异有统计学意义,F值分别为120.500、84.960和205.100,均P<0.001.Huh7细胞内3种蛋白相对表达水平为0.36±0.05、0.24±0.07、0.27±0.02,低于对照组,差异有统计学意义,F值分别为98.260、27.790和129.700,均P<0.001.结论 SEMA5A在HCC中表达下降,沉默SEMA5A表达可促进HCC的细胞增殖,抑制细胞凋亡;该作用可能与Cleaved caspase 3及Cleaved caspase 9的蛋白表达下降相关.
SEMA5A、HCC、siRNA、增殖、凋亡
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R735.7(肿瘤学)
南通市科技局项目JCZ19093
2023-05-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共9页
397-405
