10.16073/j.cnki.cjcpt.2020.19.02
靶向下调PKM2表达对骨肉瘤细胞增殖与侵袭影响
目的 骨肉瘤是常见的原发性骨恶性肿瘤,M型丙酮酸激酶(pyruvate kinase M2,PKM2)被证实与多种肿瘤进展具有相关性.本实验前期已从组织水平证明了PKM2与骨肉瘤的相关性,本研究从细胞水平探讨PKM2表达对骨肉瘤增殖与侵袭的影响,挖掘PKM2在骨肉瘤早期诊断、治疗靶点和预后评估的价值.方法 将携带靶向下调序列PKM-homo-609的siRNA转染骨肉瘤MG63细胞设为实验组(si609组),转染无关序列的MG63细胞为阴性对照组(NC组),正常培养的MG63细胞为空白对照组(KB组),通过蛋白质印迹法检测PKM2在蛋白水平的表达变化.CCK8实验、平板克隆实验检测下调PKM2表达后对骨肉瘤细胞MG63增殖能力的影响.Transwell实验检测下调PKM2后对骨肉瘤细胞MG63侵袭能力的影响.结果 si609组(S-W=0.997,P=0.962)、NC组(S-W=0.750,P=0.342)和KB组(S-W=0.998,P=0.794)的PKM2相对表达量均符合正态分布,si609组(0.48±0.15)分别与NC组(1.40±0.06)、KB组(1.42±0.16)比较,差异均有统计学意义,均P<0.05.CCK8增殖试验中,48 h si609组(S-W=0.783,P=0.324)、NC组(S-W=0.916,P=0.439)和KB组(S-W=1,P=1)吸光度(A)值均符合正态分布,si609组分别与NC组、KB组比较,差异均有统计学意义,均P<0.05.72 h si609组(S-W=1.000,P=1.000)、NC组(S-W=0.855,P=0.253)和KB组(S-W=0.812,P=0.144)A值均符合正态分布.3组组间比较,48 h(F=12.250,P=0.008)和72 h(F=114.590,P<0.001)差异有统计学意义.平板克隆实验中,si609组(S-W=0.997,P=0.900)、NC组(S-W=0.871,P=0.298)和KB组(S-W=0.991,P=0.817)的细胞克隆计数均符合正态分布;3组细胞克隆计数差异有统计学意义,F=65.73,P<0.001;进一步两两比较,si609组分别与KB组、NC组比较,差异均有统计学意义,均P<0.001.Transwell实验中,si609组(S-W=0.948,P=0.650)、NC组(S-W=0.813,P=0.212)和KB组(S-W=0.91,P=0.30)的穿膜细胞数均符合正态分布;3组穿膜细胞数差异有统计学意义(F=45.056,P<0.001),且si609组分别与KB组和NC组比较,差异均有统计学意义,均P<0.001.结论 下调PKM2表达,骨肉瘤细胞增殖与侵袭能力均下降,说明PKM2能促进骨肉瘤细胞的增殖和侵袭.
PKM2、骨肉瘤、增殖、侵袭
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R738.6(肿瘤学)
湖南省临床医疗技术创新引导计划;湖南省研究生科研创新项目;湖南省衡阳市科技局项目
2020-12-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
1536-1541
