抑制CCDC12基因对结直肠癌细胞HCT116凋亡影响机制研究
目的 卷曲螺旋结构域(coiled-coil domain containing,CCDC)结构基因家族与一部分肿瘤关系密切,但CCDC12与结直肠癌的关系还不明确.本研究探讨CCDC12基因对结直肠癌细胞HCT116凋亡的影响及其可能机制.方法 clone-67小干扰RNA(clone-67-siRNA)转染结肠癌细胞系HCT116抑制CCDC12表达;通过细胞计数法CCK-8检测细胞增殖情况;通过流式细胞术检测凋亡率;RT-qPCR和蛋白质印迹法检测对照组、con-siRNA组及转染组HCT116细胞CCDC12、PI3K、p-AKT和mTOR基因和蛋白表达.采用SPSS 17.0进行统计分析,分别采用t检验或单因素方差分析来比较各组间统计学差异.结果 clone-67-siRNA能有效沉默HCT116细胞CCDC12基因的表达,clone-67-siRNA沉默细胞中CCDC12基因后24 h检测到CCDC12基因表达为(35.68±2.97)％,48 h表达为(76.25±3·03)％,72 h表达为(54.33±1.51)％.抑制HCT116细胞中CCDC12表达后,转染组细胞活性(74.52±11.46)％明显低于对照组(100±14.33)％和con-siRNA组(95.97±13.53)％,F=10.825,P<0.001;凋亡率clone-67-siRNA组为(26.30±3.57)％,明显高于对照组的(13.10±2.15)％和con-siRNA组的(11.66±1.77)％,F=28.640,P<0.001.clone-67-siRNA转染HCT116后细胞中CCDC12、PI3K、p-AKT和mTOR的表达均降低,RT-qPCR结果(FCCDC12=38·796,PCCDC12<0.001;FPI3K=25.538,PPI3K=0.001;FPI3K=23.074,PPI3K=0.002;FPI3K=29.372,PPI3K=0.001)和蛋白质印迹结果(FPI3K=12.077,PPI3K=0.008;FPI3K=16.470,PPI3K=0.004;FPI3K=25.455,PPI3K=0.001)符合.结论 利用clone-67-siRNA抑制结直肠癌HCT116细胞CCDC12基因后可以显著抑制细胞活性,并增加细胞凋亡,其机制可能通过PI3K-AKT-mTOR信号通路途径影响.
结直肠癌、卷曲螺旋结构域12、小干扰RNA、细胞凋亡、PI3K-AKT-mTOR信号通路
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R735.3(肿瘤学)
河北省科技计划项目162777218
2018-06-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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