结直肠癌患者外周血LAP+CD4+调节性T细胞的细胞因子谱分析
目的 LAP+CD4+调节性T细胞(LAP+CD4+Treg)是新近发现的调节性T细胞亚型,在结直肠癌发病机制中的作用尚不完全清楚.本研究通过检测结直肠癌患者外周血中LAP+ CD4+ Treg的细胞因子谱,探讨其在结直肠癌发病机制中的作用.方法 收集2014-11-10-2015-02-01广西医科大学第一附属医院初次手术治疗的32例CRC患者的外周血,采用免疫磁珠法(magnetic cell sorting,MACS)分选出LAP+CD4+Treg细胞以及LAP-CD4+T细胞,并用流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测其纯度;台盼蓝掺入法检测其存活率;应用液相芯片(luminex liquichip)、酶联免疫法(enzyme-linked immunosorbent,ELISA)检测两种细胞培养上清液所含相关细胞因子IL-2、IL-4、IL-10、IL-17、干扰素-γ(Interferon-γ,IFN-γ)和转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)的浓度.结果 MACS分选获得的LAP+CD4+Treg细胞纯度为(95.14±1.67)％,LAP-CD4+T细胞纯度为(95.32±2.41)％;台盼蓝掺入法结果显示,LAP+CD4+Treg细胞存活率为(92.54±2.31)％,分选出的CD4+T细胞后存活率为(93.24±2.41)％,说明分选前后细胞均保持较高存活率,t=1.856,P＞0.08;液相芯片以及ELISA检测结果表明,LAP+CD4+Treg细胞较LAP-CD4+T细胞分泌更高浓度的IL-10分别为110.65±12.45和72.86±10.87,t=9.13,P＜0.001;TGF-β为107.03±17.69和64.19±14.15,t=7.76,P＜0.001.结论 CRC患者外周血LAP+ CD4+ Treg细胞可能通过分泌高浓度细胞免疫抑制因子IL-10、TGF-β参与了机体肿瘤的免疫逃逸机制.
结直肠癌、LAP+CD4+Treg细胞、免疫抑制、IL-10、TGF-β
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R735.3(肿瘤学)
国家自然科学基金81250316
2016-04-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
1819-1823
