STC-1蛋白对肾癌细胞生长平衡影响机制探讨
目的:研究斯钙素1(stanniocalcin1,STC-1)与缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)的相互作用,是否借助调节Ca2+水平参与肾癌细胞生长调控.方法:构建高表达HIF-1α的肾癌细胞模型,使用不同浓度STC-1蛋白干预转染后的肾癌细胞(转柒组)和单纯肾癌细胞(非转染组).MTT法检测各组细胞增殖情况;RT-PCR及ELISA法检测细胞内HIF-1α、STC-1基因及蛋白表达;荧光分光光度计检测细胞内Ca2+水平.结果:非转染组和转染组肾癌细胞HIF-1α蛋白表达分别为8.3±1.2和15.1±0.9,t=24.18,P＜0.001;STC-1蛋白表达分别为7.2±0.9和10.8±1.1,t=8.90,P=0.003;提示转染HIF-1α的肾癌细胞内HIF-1α和STC-1表达显著提高.不同浓度STC-1溶液干预非转染组肾癌细胞24 h后,对照组HIF-1α蛋白表达为8.3±0.5,低剂量组为7.8±0.7,中剂量组为5.3±0.4,高剂量组为4.2±0.3,F=171.726,P＜0.001,对照组STC-1蛋白表达为7.1±0.4,低剂量组为6.8±0.3,中剂量组为4.1±0.2,高剂量组为3.3±0.4,F=257.174,P＜0.001;对照组细胞内Ca2+含量为95.7±8.6,低剂量组为60.3±5.5,中剂量组为48.6±6.3,高剂量组为33.7±4.2,F=198.931,P＜0.001,对照组细胞增殖活性为0.226±0.021,低剂量组为0.343±0.024,中剂量组为0.293±0.018,高剂量组为0.252±0.023,F=23.615,P＜0.001;不同浓度STC-1溶液干预转染组肾癌细胞24 h后,对照组HIF-1α蛋白表达为15.3±1.6,低剂量组为14.6±1.1,中剂量组为10.1±0.9,高剂量组为8.6±0.8,F=135.696,P＜0.001,对照组STC-1蛋白表达为11.2±0.4,低剂量组为10.9±0.5,中剂量组为7.4±0.7,高剂量组为5.6±0.8,F=105.101,P＜0.001;对照组细胞内Ca2+含量为65.5±6.7,低剂量组为40.1±3.4,中剂量组为30.7±4.6,高剂量组为17.7±3.3,F=136.621,P＜0.001;对照组细胞增殖活性为0.295±0.033,低剂量组为0.446±0.025,中剂量组为0.379±0.015,高剂量组为0.313±0.022,F=45.571,P＜0.001.提示STC-1蛋白可促进单纯肾癌细胞和转染后肾癌细胞的增殖,但对两种细胞的促增殖作用却随着STC-1剂量的增加而逐渐下降,此时细胞内HIF-1α、STC-1的表达及Ca2水平进行性下降.结论:STC-1蛋白可能通过调节HIF-1α和Ca2+的水平,促进肾癌细胞增殖,但该促增殖作用又因STC-1对HIF-1α的逐渐抑制而逐渐减弱,从而调控肾癌细胞的生长平衡.
肾癌细胞、斯钙素1、缺氧诱导因子1α、钙离子、细胞增殖、抑制
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R73-3(肿瘤学)
2014-08-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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