G6PD缺陷诱发人黑色素瘤A375细胞凋亡机制研究
目的:探讨葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PD)缺陷对A375细胞凋亡的影响及其可能的机制.方法:以A375-WT和A375-G6PD△细胞为模型,用Real-time PCR检测G6PD mRNA表达,蛋白质印迹法检测G6PD、Bcl-2、Bcl-xL、STAT5和P-STAT5蛋白的表达,紫外分光光度法测定G6PD酶活性,Heochst 33342/PI 双染流式细胞仪检测细胞凋亡,免疫组化观察STAT5蛋白核迁移.结果:A375-WT和A375-G6PD△细胞中G6PDmRNA分别为0.545±0.13和0.207±0.03,降低了62.02％,t=-5.854,P=0.028;G6PD蛋白分别为0.975±0.16和0.227±0.10,降低了76.72％,t=-21.593,P=0.002;G6PD酶的比活性分别为(0.088±0.023)和(0.024±0.008) U/mg;降低了72.23％,t=-7.390,P=0.018;A375-G6PD△细胞的凋亡率为(8.62±1.67)％,比A375-WT细胞的(2.37±0.78)％升高了3.64倍,t=-12.163,P=0.007; A375-G6PD△细胞抗凋亡蛋白Bcl-2的表达量为0.245±0.037,比A375-WT细胞的0.578±0.073降低了57.61％,t=-16.021,P=0.004;Bcl-xL的表达量为0.138±0.019,比A375-WT细胞的0.287±0.067降低了51.92％,t=-5.377,P=0.033;A375-G6PD△细胞的P-STAT5/STAT5比值为0.72±0.201,比A375-WT细胞的2.28±0.367降低了68.4％(P=0.004),细胞核内STAT5表达为0.051±0.012,比A375-WT细胞核的STAT5蛋白(0.093±0.018)降低了45％(P=0.007),STAT5核迁移减少.结论:转录因子STAT5磷酸化降低、活性下降是G6PD缺陷所诱发的人黑色素瘤A375细胞凋亡的重要因素之一,为黑色素瘤发生及治疗的研究提供了新的思路.
黑色素瘤、G6PD缺陷、STAT5、A375细胞、细胞凋亡
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R73-3(肿瘤学)
2014-08-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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