miR-101对骨肉瘤MG-63细胞增殖和凋亡影响机制探讨

摘要：

目的:通过调控微小RNA-101 (miR-101)在骨肉瘤细胞MG-63中的表达,探讨miR-101对MG-63细胞增殖和凋亡的作用及其可能机制.方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR 101在人骨肉瘤MG63细胞和成骨细胞中的相对表达;化学合成miR-101模拟序列(Mimics)和其阴性对照序列,以脂质体为载体,分别转染骨肉瘤MG63细胞,并设立空白对照组;qRT-PCR检测3组细胞miR-101的表达;MTT法检测3组细胞的增殖;流式细胞仪检测3组细胞凋亡及细胞周期变化;免疫印迹法检测转染后3组细胞自噬相关蛋白Beclin1和LC3B表达.结果:qRT-PCR检测结果显示,成骨细胞miR-101的相对表达(2.56±0.27)是未转染骨肉瘤细胞(1.52±0.20)的1.68倍,P=0.003;转染后qRT-PCR检测结果显示,模拟物转染组miR-101的表达(3.86±0.28)较空白对照组(1.31±0.32)和阴性对照组(1.35±0.31)分别上调了2.95倍和2.86倍,F=70.28,P＜0.001.MTT结果显示,miR-101模拟物转染组骨肉瘤细胞增殖速率较空白和阴性对照组明显抑制,P＜0.01.流式细胞分析结果显示,模拟物转染组G0/G1期细胞百分比为(13.02±1.05)％,较空白对照组(3.15±0.98)％和阴性对照组(3.26±0.94)％明显增加,P＜0.001;模拟物转染组细胞凋亡率为(11.28±1.45)％,较空白对照组(3.02±0.96)％和阴性对照组(3.16±0.78)％明显增加,P＜0.001.蛋白印迹结果显示,模拟物转染组自噬相关蛋白Beclin1和LC3B的表达较空白对照组均下降.结论:miR-101在骨肉瘤MG-63细胞中呈低表达,可能与骨肉瘤的发生和发展相关.miR-101可抑制骨肉瘤MG-63细胞的增殖和自噬,诱导细胞凋亡和周期阻滞,其机制可能是通过抑制其自噬而发挥作用.

关键词：骨肉瘤、miR-101、转染、细胞增殖、细胞凋亡

所属期刊栏目：21

分类号：R738(肿瘤学)

在线出版日期：2014-04-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：428-432