稳定表达RFX6基因肝癌细胞株的建立

摘要：

目的:建立稳定表达RFX6基因的肝癌细胞株.方法:构建人源RFX6基因的重组质粒(pLNCX2-RFX6),pVSV-G质粒分别与pLNCX2-RFX6和空载体pLNCX2共转染至GP2-293细胞中进行包装,并用包装的逆转录病毒感染人肝癌QGY-7703细胞株,G418筛选出阳性克隆.RT-PCR和蛋白质印迹法验证稳定细胞株RFX6基因表达情况.采用Image J软件进行灰度值分析比较两株细胞系的差异.结果:在QGY-7703-pLNCX2-RFX6和QGY-7703-pLNCX2细胞中,RFX6/18S mRNA电泳条带灰度比值分别为5.044 0±1.384 0和0.357 2±0.407 9,QGY-7703-pLNCX2-RFX6细胞RFX6/18S是QGY-7703-pLNCX2细胞的14.1倍,差异有统计学意义,t=4.143,P＜0.05;而在两细胞株中,RFX6/GAPDH的蛋白质印迹条带灰度值分别为1.391 4±0.141 3和0.127 8±0.037 3,QGY-7703-pLNCX2-RFX6细胞RFX6/GAPDH是QGY-7703-pLNCX2细胞的10.9倍,差异有统计学意义,t=14.966,P＜0.05.结论:成功构建稳定表达RFX6基因的肝癌细胞株,为研究RFX6基因在肝癌细胞中的功能奠定了基础.

关键词：肝肿瘤、RFX6、逆转录病毒、稳定细胞株、肝癌细胞QGY-7703、印迹法,蛋白质

所属期刊栏目：20

分类号：R735.7(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金30972916,81172344

在线出版日期：2013-07-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：968-971