5-aza-CdR增强吉非替尼对人非小细胞肺癌细胞株H1650敏感性机制的研究

摘要：

目的:探讨EGFR基因启动子甲基化水平与人非小细胞肺癌细胞株H1650对吉非替尼敏感性之间的关系.方法:5-aza-CdR和吉非替尼单独或联合用药作用于H1650细胞株后,应用甲基化特异性PCR法检测EGFR基因启动子区甲基化状态；CCK-8法检测细胞增殖率；流式细胞仪技术检测细胞凋亡率变化；蛋白质印迹法和实时荧光定量PCR法检测EGFR蛋白和mRNA的表达情况.结果:5-aza-CdR可去除H1650细胞EGFR基因启动子区甲基化;CCK-8法检测结果显示,H1650对吉非替尼的敏感性较差,5-aza-CdR去甲基化后联合运用吉非替尼处理72 h.联合用药组IC50为(2.93±0.95) μmol/L,与吉非替尼组(14.53士1.13)μmol/L,5-aza-CdR组(4.91士1.42)μmol/L比较显著降低,P＜0.05；流式细胞仪技术结果显示,联合用药组细胞凋亡率为(83.62±4.3)％,与吉非替尼组(20.29士2.9)％、5-aza-CdR 组(25.73±7.5)％比较,差异有统计学意义,P＜0.05;蛋白质印迹法和实时荧光定量PCR法结果显示,吉非替尼与5-aza-CdR联合用药干预72 h后细胞EGFR蛋白和mRNA表达显著下降,与单药组相比,具有统计学意义,P＜0.05.结论:EGFR基因启动子区甲基化可能是非小细胞肺癌细胞株H1650对吉非替尼获得性耐药的机制之一.

关键词：癌、非小细胞肺、表皮生长因子受体、DNA甲基化、吉非替尼、5-aza-CdR、H1650细胞

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分类号：R734.2(肿瘤学)

资助基金：江苏省科技厅科研基金BK2009446;吴阶平医学基金320.6700.09050

在线出版日期：2012-08-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：423-427