食管癌细胞Ezrin基因转录调控区克隆及其启动子活性的鉴定

摘要：

目的:克隆食管癌侵袭转移相关基因Ezrin的转录调控区序列,进行启动子活性鉴定及初步的生物信息学分析.方法:利用在线程序对Ezrin基因可能的转录调控区进行GC含量和CpG岛分析以及转录因子结合位点预测,采用PCR法从食管癌细胞基因组DNA中克隆Ezrin基因-1759/+134和-726/+134区段,构建萤火虫荧光素酶报告基因表达质粒pGLB-hE(-1759/+134)和pGLB-hE(-726/+134),检测所克隆片段的启动子活性.结果:Ezrin基因5'侧翼区为高GC含量区,存在CpG岛,无典型的TATA盒,然而转录因子Spl结合位点却无处不在.与对照质粒pGLB相比,重组质粒pGLB-hE(-726/+134)具有较强的荧光素酶活性,pGLB-hE(-1 759/+134)的荧光素酶活性约是pGLB-hE(-726/+134)的2倍.结论:Ezrin基因的-726/+134区段具有启动子活性,含有Ezrin基因的核心启动子区和调节性启动子区;-1759/-726区段具有增强启动予活性的作用,含有Ezrin基因增强子元件区.

关键词：食管肿瘤、基因、ezrin、基因表达调控、荧光素酶活性检测

所属期刊栏目：15

分类号：R73-3;R735.1(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金30672376,30570849,30370641;教育部博士点基金20050560002;中国博士后科学基金20070410846;广东省自然科学基金重点项目05104541;广东省自然科学基金博士科研启动项目7301043

在线出版日期：2009-04-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1764-1767