乏氧条件启动HRE调控HSV-TK/GCV效应链对人肺腺癌A549细胞杀伤作用的观察

摘要：

目的:观察由缺氧反应元件(HRE)调控的单纯疱疹病毒胸苷激酶/丙氧鸟苷(HSV-TK/GCV)系统对乏氧环境中的人肺腺癌细胞系A549细胞的杀伤作用.方法:将HRE调控HSV-TK和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)双基因共表达的真核载体pHRE-TK通过脂质体导入A549细胞,分别在乏氧(O2浓度为3%)和常氧(O2浓度为21%)环境中培养,荧光显微镜观察重组载体转染A549细胞后报告基因EGFP表达变化,并进行荧光光密度(FOD)分析;再予以GCV处理5 d后,用MTT法检测GCV对培养细胞的杀伤效果.设立分别仅含有HRE、HSV-TK以及两者均无的3个荧光表达载体(pHRE、pTK、pEGFP)为对照组.结果:在乏氧环境中,由HRE调控的重组载体pHRE-TK和pHRE转染A549细胞后,其FOD值高于无HRE调控的载体pTK和pEGFP转染组P＜0.01;而在常氧环境中各组细胞之间FOD值差异无统计学意义,P＞0.05.携带HSV-TK基因的重组载体pHRE-TK和pTK转染A549细胞后,细胞对GCV的敏感性均高于无HSV-TK基因的pHRE组细胞,P＜0.01;敏感性随GCV浓度增加而增大.在乏氧环境中培养的pHRE-TK组细胞对GCV的敏感性高于pTK组(P＜0.01),亦高于在常氧环境中培养的pHRE-TK组细胞,P＜0.01;而在常氧环境中,pHRE-TK组与pTK组细胞对GCV的敏感性差异无统计学意义,P＞0.05.结论:在乏氧的A549细胞内,HRE使报告基因EGFP表达增强;HRE能增强HSV-TK/ GCV系统对乏氧环境中的A549细胞的杀伤效率.

关键词：肺肿瘤、腺癌、缺氧、反应条件、单纯疱疹病毒属、胸苷激酶、更昔洛韦

所属期刊栏目：15

分类号：R734.2(肿瘤学)

在线出版日期：2008-05-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：248-251