Bcl-2基因在人膀胱癌细胞中表达对CTL凋亡诱导作用的影响

摘要：

目的:探讨Bcl-2基因在人膀胱癌细胞中表达对细胞毒性T淋巴细胞(CTL)凋亡诱导作用的影响.方法:采用基因重组技术构建真核表达载体pcDNA3.1(+)/Bcl-2;应用脂质体介导的基因转染技术将pcDNA3.1(+)/Bcl-2导入膀胱癌BIU-87细胞,RT-PCR检测Bcl-2基因表达水平;不同浓度抗Fas单克隆抗体(Anti-Fas mab)模拟CTL的Fas-配体(Fas-L)处理转染与未转染Bcl-2基因的膀胱癌细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、吖啶橙(AO)荧光染色法和流式细胞检测仪(FCM)分析细胞存活和凋亡情况.结果:酶切和核酸测序证明真核表达载体pcDNA3.1(+)/Bcl-2构建成功.将重组质粒转染膀胱癌细胞后,RT-PCR分析表明,转染Bcl-2基因的BIU-87/Bcl-2细胞的Bcl-2基因表达水平较BIU-87细胞和转染空载体的BIU-87/neo细胞显著增高,P＜0.01.Anti-Fas mab 作用后,BIU87/Bcl-2细胞的存活率显著高于BIU-87和BIU-87/neo细胞,P＜0.05或P＜0.01.3种细胞虽均发生凋亡的形态学改变,但BIU87和BIU87/neo细胞改变更为明显,两者的凋亡率分别为(25.33±3.00)%和(27.05±1.75)%,而BIU-87/Bcl-2细胞的凋亡率为(18.06±1.41)%,显著低于前两者,P＜0.01.结论:Bcl-2基因高表达通过阻断CTL杀伤膀胱癌细胞的Fas/Fas-L途径,使膀胱癌细胞能够抵御免疫系统中CTL的攻击.

关键词：膀胱肿瘤/病理学、基因、Bcl-2、细胞凋亡、流式细胞术

所属期刊栏目：14

分类号：R737.14(肿瘤学)

资助基金：辽宁省自然科学基金20042082

在线出版日期：2007-08-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1073-1076