10.13452/j.cnki.jqmc.2023.03.003
乳酸对非小细胞肺癌细胞线粒体自噬的影响
目的 本研究旨在探讨乳酸对人非小细胞肺癌细胞线粒体自噬的影响.方法 将人正常肺上皮细胞(BEAS-2B)和非小细胞肺癌细胞(A549)分别给予常氧(21%O2)和低氧(1%O2)处理,测定细胞在常氧和低氧条件下的乳酸生成情况;用外源乳酸(0、5、10 mM)在常氧和低氧条件下分别处理BEAS-2B和A549 细胞,应用qPCR法分析线粒体DNA拷贝数,用蛋白免疫印迹法检测LC3B、TOM20、HSP60 蛋白水平;使用Mitotracker® Red(581/644 nm)、Lyso View Blue法检测线粒体及溶酶体共定位情况.结果 与常氧组相比,低氧组BEAS-2B和A549 的乳酸生成量明显升高(P<0.05).未用乳酸干预时,相比于常氧组,低氧组A549 线粒体拷贝数明显增加(P<0.0001),BEAS-2B线粒体拷贝数明显减少(P<0.0001);用乳酸干预后,常氧组和低氧组A549 线粒体拷贝数随乳酸浓度增加而减少,BEAS-2B线粒体拷贝数变化则呈相反趋势.与对照组相比,常氧组和低氧组经乳酸干预后,BEAS-2B、A549 细胞中的 LC3B-Ⅱ/Ⅰ比值增加,A549 细胞中的HSP60、TOM20 蛋白表达水平下降,而BEAS-2B细胞中的HSP60、TOM20 蛋白表达水平无明显改变;在常氧和低氧条件下与对照组相比,Lac-10 mM组A549 细胞线粒体和溶酶体荧光共定位增强,差异有统计学意义(P<0.05).结论 乳酸可以增强非小细胞肺癌细胞线粒体自噬功能.
低氧、乳酸、非小细胞肺癌、A549细胞、自噬
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R392.12
青海省科技厅应用基础研究项目;青海省卫健委科研课题重点项目
2023-11-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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164-171